ORIGINAL_ARTICLE
بررسی بقا و دامنه میزبانی جدایههای Phythophthora capsici*
گونه Phytophthora capsici اولین بار توسط لئونیان در سال 1922 از فلفل در نیومکزیکو جداسازی و توصیف شد. در ایران اگرچه P. capsici از میزبانهای مختلف گزارش شده است، اما اطلاعات دقیقی در خصوص تنوع جمعیت، دامنه میزبانی، ساختار بقا و تیپ آمیزشی این قارچ در دست نیست. این پژوهش به منظور تعیین دامنه میزبانی بیمارگر به ویژه روی گیاهان چوبی انجام شد. دمای بهینه رشد، فراوانی تیپ آمیزشی و تشکیل کلامیدوسپور در محیط زنده و غیر زنده با استفاده از 20 جدایه P. capsiciاز میزبانهای گیاهی مختلف شامل کدو، فلفل، گوجهفرنگی و علف هرز بررسی شد. نتایج نشان داد که هر دو تیپ آمیزشی بیمارگر با فراوانی تقریباً مساوی میان جدایهها وجود داشت. بیمارگر کلامیدوسپورهای فراوانی روی محیط کشت هویج آگار، شاهدانه آگار و بافت ریشه و طوقه کدو تولید کرد. از بین شش گیاه چوبی مایهزنی شده، بادام، زردآلو و پسته رقم سرخس بالاترین میزان حساسیت را نشان دادند اما نهالهای فندق، کیوی و ازگیل آلوده نشدند. تمام جدایههایآزمایش شدهP. capsici روی کدو بیماریزا بودند اما فلفل به اکثر جدایهها مقاوم بود.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10991_5d04f2db371ab0a225461f75fffdbf83.pdf
2014-12-01
109
122
: Phytophthora capsici
تیپ آمیزشی
کلامیدوسپور
دامنه میزبانی
گیاه چوبی
حمیده
پاسندی
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
مطالعه خصوصیات مورفولوژیکی و روابط فیلوژنتیکی در گونه Bipolaris oryzae و تعدادی از گونههای جنس Bipolaris به دست آمده از برنج و علفهای هرز
بیماری لکه قهوهای برنج یکی از مهمترین بیماریهایی است که خسارت نسبتا قابل ملاحظهای به برنج وارد میکند. در طی سالهای زراعی 1390-1391، 348 جدایه های Bipolarisاز مزارع برنج (بذرها و برگها) و علفهای هرز حاشیه مزارع برنج استانهای مازندران، گیلان، گلستان، خوزستان و فارس جداسازی شد. با مطالعه خصوصیات مورفولوژیکی جدایهها شش گونه از جنس مذکور شامل B. oryzae، B. cynodontis، B. spicifera، B. bicolor، B. sorokiniana و B. neergaardii شناسایی شد. گونه B. oryzae با 303 جدایه به عنوان گونه غالب از برگهای دارای علایم لکه قهوهای و بذرهای برنج و 12 جدایه مشکوک به گونه B. oryzae از سوروف (Echinochloa colona)، پاسپالوم (Paspalum scrobiculatum)، ذرت، موز و گیاه گرامینه ناشناخته جداسازی شد و بقیه گونههای Bipolarisاز برگها و بذرهای بدون علایم بیماری لکه قهوهای برنج جداسازی شدند. تنوع مورفولوژیکی زیادی بین جدایههای B. oryzae از نظر رنگ پرگنه، شکل و ابعاد کنیدیومها دیده شد و در چهار گروه مورفولوژیکی قرار گرفتند. با این حال براساس توالییابی ناحیه rDNA-ITS و ژن gpd جدایههای انتخاب شده به عنوان گونه B. oryzae شناسایی شدند و عامل بیماری لکه قهوهای برنج در ایران نیز گونه مذکور تشخیص داده شد و گیاهان سوروف، پاسپالوم، ذرت، موز و گیاه گرامینه ناشناخته میزبانهای جدیدی برای گونه مذکور معرفی میشوند. همچنین به مطالعه روابط فیلوژنتیکی گونههای Bipolaris در مطالعه حاضر براساس توالییابی ناحیه rDNA-ITS و ژن gpdپرداخته شده است.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10992_8a7575282b3cdb1e21ff45ed1bea4fb0.pdf
2014-12-01
123
135
قارچ
تاکسونومی قارچ
بیماریهای برنج
برنج
فیلوژنی قارچ
Cochliobolus
عبداله
احمدپور
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
تعیین برخی از ویژگیهای بیولوژیکی و مولکولی فیتوپلاسماهای همراه با زردی مو در استانهای فارس و لرستان*
زردی فیتوپلاسمایی یکی از بیماریهای مهم و اقتصادی انگور در بسیاری از نقاط جهان است. در بازدیدهای سالهای1391 و1392 علائمی شبیه به علائم زردی فیتوپلاسمایی در مناطق موکاری استانهای فارس و لرستان مشاهده و قلمههایی انتخاب و کشت گردید. عامل زردی بااستفاده از سس (Cuscuta campestris Yank.) از موهای حاصل از کشت قلمههای تهیه شده از موهای دارای علائم در استانهای فارس و لرستان به پروانش و با استفاده از پیوند از پروانش به پروانش انتقال داده شد و در پروانشهای مایهزنی شده تولید علائم بارز بیماریهای فیتوپلاسمایی کرد. درآزمون واکنش زنجیرهای پلیمراز(PCR) مستقیم با استفاده ازنمونههای پروانش مایهزنی شده و جفت آغازگر P1/P7قطعه مورد انتظار( 1800 جفت باز از اپرون ار ان ای ریبوزومی) تکثیر شد. در آزمون پی سی آر دو مرحلهای با استفاده از جفت آغازگر P1/P7 در دور اول و R16F2n/R16R2 در دور دوم نیز قطعه مورد انتظار( 1200 جفت باز از ژن آر ان ای ریبوزومیSُ16ُ) تکثیر شد واز این لحاظ 12 نمونه از 20نمونه مو مبتلا به زردی تاکستانهای فارس و لرستان، موهای علائمدار حاصل از کشت قلمهها و پروانشهای مایهزنی مثبت بودند. محصولات پی سی آر مستقیم جدایههای فارس و لرستان همسانهسازی و تعیین ترادف شده و به ترتیب تحت رس شمارهای KF130967 و KF130968 در بانک جهانی ژن ثبت گردیدند. جستجو با برنامه بلاست نشان داد که فیتوپلاسماهای عامل زردی مو در فارس و لرستان در بین ترادفهای موجود در بانک جهانی ژن، بیشترین شباهت را با فیتوپلاسماهای گروه آر ان ای ریبوزومی تورم جوانه (Stolbur, 16SrXII)دارند. مقایسه چند شکلی طولی قطعات برشی (RFLP)حقیقی با استفاده ازمحصول PCR دو مرحلهای و RFLP مجازی با استفاده از ترادف ناحیه تکثیری جفت آغازگرR16F2n/R16R2. نشان داد که فیتوپلاسماهای زردی مو در استانهای فارس و لرستان از یکدیگر قابل تشخیص نیستند و متعلق به زیر گروهA در گروه 16SrXII میباشند. با تعیین میزان تشابه نوکلئوتیدی و آنالیزتبارزایی با استفاده از ترادف کامل ژن آر ان ای ریبوزومی Sُ16 نیز تعلق فیتوپلاسماهای زردی مو در استانهای فارس و لرستان به16SrXII-A تأیید شد. مقایسه نقوش حاصل از RFLP مجازی نشان داد که فیتوپلاسمای عامل زوال مو در استان خراسان جنوبی با فیتوپلاسماهای عامل زردی مو در استانهای فارس و لرستان و سایر فیتوپلاسماهای گروه16SrXII-A متفاوت است. این اولین گزارش از وجود بیماری زردی فیتوپلاسمایی در غرب و جنوب ایران است. وجود زردی فیتوپلاسمایی مو در نواحی مختلف نشان میدهد که این بیماری در ایران سابقه طولانی دارد.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10993_676c8e926d03aef63af32389e39d58cb.pdf
2014-12-01
137
137
زردی مو
فیتوپلاسما
انتقال با سس بیماریهای مو
گروه 16SrXII
الهام
صالحی
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
ارزیابی روابط فیلوژنتیکی گونه های Trichoderma به دست آمده از شالیزارهای استان مازندران بر اساس توالیهای ژن tef1α
جنس Trichodermaاز مهمترین جنسهای قارچی در زمینه کنترل بیولوژیک بیماریهای گیاهی، افزایش رشد و القای مقاومت در گیاهان به شمار میرود. ارتباط فیلوژنتیکی 81 جدایه متعلق به شش گونه از این جنس (شامل چند جدایه بیوکنترل امید بخش) که از مزارع برنج استان مازندران به دست آمدهاند، بر اساس توالی قطعهای از ژن αtef1بررسی شد. توالیهای ژن مذکور در جدایههای مورد آزمایش به همراه توالیهای به دست آمده از بانک ژن همردیفسازی شدند و تجزیه و تحلیل دادهها با روشهای پیوست همسایهها، پارسمونی بیشینه و تکامل کمینه انجام شد. نتایج نشان داد که جدایههای متعلق به T. harzianum (فراوانترین گونه شالیزار در این تحقیق) 14 هاپلوتیپ مختلف را تشکیل دادند که در پنج گروه مجزا قرار گرفتند و بنابراین این گونهی مرکب، بیشترین تنوع ژنتیکی را به نمایش گذاشت. جدایههای T. virens (دومین گونه فراوان مزارع برنج مازندران در این بررسی) فقط در دو هاپلوتیپ گروهبندی شدند. گونههای T. atroviride و T. hamatum با سه و دو جدایه به ترتیب سه و دو هاپلوتیپ را تشکیل دادند. سویههای بیوکنترل متعلق به یک گونه دارای هاپلوتیپهای متفاوتی بودند و همراه با سویههای غیر آنتاگونیست در شاخههای جداگانهای قرار گرفتند. در نتیجه، هاپلوتیپ منحصر به فردی از αtef1 که به خاصیت آنتاگونیسم مرتبط باشد، بر اساس تجزیه و تحلیل توالی αtef1تشخیص داده نشد. ارتباطی بین هاپلوتیپ و مکان جغرافیایی وجود نداشت و از یک مزرعه، گونهها و هاپلوتیپهای مختلف جداسازی شدند.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10994_8987283eb6aaa72789596257bf965e2f.pdf
2014-12-01
139
149
: تنوع زیستی
هاپلوتیپ
برنج
کنترل بیولوژیک
ایران
شهرام
نعیمی
1
نوسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
اثر عصاره برگ کرفس در القای مقاومت علیه بیماری سفیدک پودری خیار*
بیماری سفیدک پودری که عامل آن قارچ Podosphaera fusca است، یکی از بیماریهای مهم کدوئیان است و رایجترین روش کنترل آن استفاده از قارچکشها میباشد. اما اثرات جنبی کاربرد قارچکشها یافتن روشهای دیگری را برای کنترل بیماری ضروری میسازد که از جمله آنها، القای مقاومت در گیاه است. در این پژوهش، اثر عصاره برگ کرفس در کنترل بیماری سفیدک پودری خیار و امکان القای مقاومت سیستمیک در گیاه، در آزمایشهای گلخانهای بررسی شد. بدین منظور، عصاره آبی، استونی و یا متانولی برگ کرفس با غلظتهای 1% و 5% (وزن به حجم)، یک روز قبل و یا یک روز بعد از مایهزنی بیمارگر روی برگهای میزبان بهکار رفت و سپس شدت بیماری بر اساس تعداد لکههای ایجادشده روی برگ، ده روز پس از مایهزنی محاسبه شد. به علاوه، اثر این عصاره در کنترل سیستمیک بیماری و نیز بر تندش اسپور بیمارگر در سطح برگ مایهزنی شده بررسی شد. همچنین پس از تیمار اولین برگ حقیقی با عصاره کرفس، اثر آن بر فعالیت آنزیم بتا 1، 3 گلوکاناز در اولین و دومین برگ حقیقی بوته سالم و مایهزنی شده با بیمارگر، بررسی و با شاهد مقایسه گردید. نتایج نشان داد که عصاره برگ کرفس بیماری را بهصورت موضعی در برگ اول کنترل کرد و کاربرد عصاره استونی آن در غلظت 5% تأثیر بیشتری در کنترل بیماری داشت. از طرفی کاربرد عصاره تأثیری بر جوانهزنی اسپور قارچ نداشت. بنابراین بهنظر میرسد که کنترل بیماری توسط این عصاره، نه به دلیل خاصیت ضدقارچی، بلکه از طریق القای مقاومت در گیاه باشد. از طرف دیگر باتوجه به اینکه تغییرات فعالیت آنزیم بتا 1، 3 گلوکاناز در تیمارهای مختلف هماهنگی مشخصی با کنترل بیماری نشان نداد، بهنظر میرسد این آنزیم نقش خاصی در مقاومت به بیماری ندارد و لازم است سایر سازوکارهای احتمالی القای مقاومت بررسی شود.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10997_c187777e9fd2f3fd27388078101ec064.pdf
2014-12-01
151
161
Podosphaera fusca
مقاومت القایی
عصاره گیاهی
آنزیم بتا 1
3 گلوکاناز
اعظم
سیروس
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
وراثت مقاومت به بیماری زنگ زرد در تعدادی از ارقام تجاری و ژنوتیپهای انتخابی امیدبخش گندم استان فارس*
به منظور مشخص شدن نحوه توارث مقاومت به بیماری زنگ زرد و تعداد ژنهای دخیل در مقاومت به بیماری در 17 لاین انتخابی امیدبخش گندم مربوط به اقلیم معتدل کشور، دو لاین انتخابی S-78-11 و S-79-10 از ژنوتیپهای امیدبخش اقلیم گرم و چهار رقم گندم تجارتی داراب 2، نیک نژاد، بهار و استار، تلاقیهای بسیاری از این ارقام و لاینها با رقم حساس استاندارد Avocet S انجام شده و بذرهای F1 ، F2 و F3 از هر تلاقی تولید شدند. جهت انجام تجزیه ژنتیکی، از عکسالعمل دو جمعیتF3 منتج از همه تلاقیها در مرحله گیاه کامل، یک جمعیت F3 حاصل از تلاقی رقم بهار با Avocet Sدر مرحله گیاهچهای،والدین و ارقام شاهد نسبت به پاتوتیپ (نژاد) غالب زنگ زرد استان فارس (پاتوتیپ 166E138A+) یادداشتبرداری شد. نتایج نشان داد که ژنوتیپهای امیدبخش M-79-4, M-79-5, M-79-13, M-79-18, M-80-13, M-80-20, M-81-5, از اقلیم معتدل، دو ژنوتیپ S-78-11 و S-79-10 از اقلیم گرم و رقم داراب 2 هرکدام دارای یک ژن مقاومت مرحله گیاه کامل و ژنوتیپهای امیدبخش M-79-17, M-80-6, M-80-12, M-81-8, M-81-13, M-81-15 هرکدام دارای دو ژن مقاومت مرحله گیاه کامل هستند. همچنین واکنش مقاومت ژنوتیپهای امیدبخشM-80-4, M-80-5, M-81-18 و رقم نیک نژاد در مرحله گیاهچه و در مرحله گیاه کامل دلالت بر وجود دو ژن مقاومت داشت. تجزیه ژنتیکی در مراحل گیاهچه و گیاه کامل برای تلاقی رقم بهار با Avocet S نشاندهنده وجود یک ژن مقاومت از نوع گیاهچهای و نیز یک ژن مقاومت از نوع گیاه کامل برای این ژنوتیپ بود. رقم استار و ژنوتیپهای امیدبخش M-79-13 وM-81-3 فاقد هر گونه ژن مقاومت نسبت به پاتوتیپ مذکور بودند. تجربیات گذشته در ارتباط با زنگهای گندم دلالت بر این دارد که تکیه بر مقاومتهای تک ژنی بهخصوص از نوع مقاومت مرحله گیاهچهای که در برخی از ارقام و لاینهای امیدبخش تحقیق حاضر نیز تعیین شد کم دوام بوده و اغلب با خطر شکسته شدن مقاومت در یک برهه زمانی کوتاه (5-4 سال) مواجه میباشد. بهکارگیری ژنهای مقاومت رقم نیکنژاد و لاینهای امیدبخشی که دارای دو ژن مقاومت مرحله گیاه کامل بودند در برنامههای اصلاحی جهت تولید ارقام مقاوم به زنگ زرد گندم توصیه میشود.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10998_f80ac81fcaee1a749d0f9420dc57048b.pdf
2014-12-01
163
174
گندم
زنگ زرد
پاتوتیپ (نژاد)
تجزیه ژنتیکی
مقاومت
عبدالکریم
ذاکری
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
همراهی فیتوپلاسماهایی از گروههای جاروک نخود کبوتر (16SrIX)و افژولش شبدر(16SrVI) با بیماری تورم جوانه گوجه فرنگی در ایران*
تورم جوانه یکی از بیماریهای مهم گوجه فرنگی در ایران و سایر نقاط دنیا میباشد. دربازدیدهای سالهای 89-1388 این بیماری در مزارع گوجه فرنگی استانهای خراسان رضوی، خراسان شمالی، آذربایجان شرقی، آذربایجان غربی، کردستان، کرمانشاه و فارس دیده گردید. علائم بارز بیماری عبارت بودند از کوچک ماندن، ضخیم شدن و رنگپریدگی برگها، ارغوانی شدن رگبرگها در قسمت زیرین برگ، رشد جوانههای جانبی ساقه، ضخیم شدن ساقه، تغییرات گل شامل بزرگ شدن کاسبرگ هایی که در انتها به هم چسبیدهاند و تبدیل کاسه گل به یک جسم کیسه مانند، گل سبزی و فیلودی و عدم تشکیل میوه. عامل بیماری از طریق پیوند از گوجه فرنگی به گوجه فرنگی و به وسیله سس (Cuscuta campestris Yunck.)از گوجه فرنگی به پروانش انتقال داده شد. از پنج بوته گوجه فرنگی دارای علائم تورم جوانه در هر استان، بوتههای گوجهفرنگی و پروانش مایهزنی شده، پروانش آلوده به عامل بیماری جاروک لیموترش به عنوان کنترل مثبت و گیاهان سالم گوجه فرنگی و پروانش به عنوان کنترل منفی دی ان ای کل استخراج و دی ان ای هر نمونه از نظر آلودگی فیتوپلاسمایی با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز(PCR) آزمایش شد. در آزمون پی سی آر مستقیم با استفاده از جفت آغازگرP1/P7 وآزمون پی سی آر دو مرحله ای با استفاده از جفت آغازگرهای P1/P7 (دور اول) وRl6F2n/Rl6R2 (دور دوم) در نمونههای دی ان ای گوجه فرنگی دارای علائم در طبیعت، نمونههای گوجه فرنگی و پروانش مایهزنی شده و دارای علائم و کنترل مثبت قطعات مورد انتظار(به ترتیب 1800 و 1200جفت باز) از دی ان ای ریبوزومی تکثیر شد. هضم آنزیمی محصول پی سی آر دو مرحله ای با استفاده از آنزیمهای AluI, RsaI, HinfI, HaeIII, HpaII وTaqI نشان داد که عامل تورم جوانه در استانهای کردستان و خراسان شمالی متعلق به گروه جاروک نخود کبوتر(pigeon pea witches’ broom ) ا (گروه آر ان ای ریبوزومی 16SrIX) و در استانهای خراسان رضوی، آذربایجان شرقی، آذربایجان غربی، کرمانشاه و فارس متعلق به گروه افژولش شبدر(clover proliferation) یا گروه آر ان ای ریبوزومی16SrVI می باشد. محصول پی سی آر مستقیم نمونههای تورم جوانه در این استانها با استفاده ازInsT/AcloneTM PCR Product Cloning Kit در پلاسمیدpTZ57R/T و در سویه Escherichia coli DH5a همسانهسازی و تعیین ترادف شد. آنالیز تبارزایی ترادف ناحیه میانی ژنهای آار ان ای ریبوزومیS 16و S 23 نیز عامل تورم جوانه گوجه فرنگی در استانهای کردستان و خراسان شمالی را با فیتوپلاسماهای گروه16SrIX و عامل تورم جوانه در استانهای خراسان رضوی، آذربایجان شرقی، آذربایجان غربی، کرمانشاه و فارس را بافیتوپلاسماهای گروه16SrVI طبقهبندی کرد. RFLP کامپیوتری با استفاده از ترادف 1200 جفت بازی از ژن آر ان ای ریبوزومـی S16 و 17 انزیم برشی علاوه بر تأیید نتایج آنالیزهای RFLP فیزیکی و تبارزایی نشان داد که فیتوپلاسماهای طبقهبندی شده با گروه16SrIX متعلق به زیر گروه16SrIX-E و فیتوپلاسماهای طبقهبندی شده با گروه16SrVI متعلق به زیر گروه16SrVI-A هستند. این اولین گزارش از وجود بیماری فیتوپلاسمایی تورم جوانه در استانهای خراسان رضوی، خراسان شمالی، آذربایجان شرقی ، کردستان و کرمانشاه وگروه بندی فیتوپلاسماهای ردیابی شده در این تحقیق است.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_10999_683b8a277aacc9d14d2362082419dab9.pdf
2014-12-01
175
175
فیتوپلاسما
تورم جوانه
RFLP
تعیین ترادف
درخت فیلوژنی
گوجه فرنگی
الهام
جمشیدی
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
بیوکنترل بیماری و القا برخی ترکیبات دفاعی در گیاه گوجه فرنگی آلوده به نماتود Meloidogyne javanica توسط چند جدایه *Trichoderma
در این تحقیق بیست جدایه قارچ تریکودرما به عنوان عوامل بیوکنترل نماتود ریشه گرهی مورد آزمایش قرار گرفتند. ابتدا جدایهها در محیط کشت مایع حاوی کیتین کلوئیدال کشت شدند. سه جدایه 125، 126 و Bi 10 از قارچ Trichoderma harzianum بیشترین میزان فعالیت آنزیم کیتیناز را نشان دادند. بررسی شش جدایه از میان قویترین و ضعیفترین جدایهها از نظر میزان فعالیت کیتیناز در کنترل نماتود در گلخانه نشان داد که همبستگی مثبت بین میزان فعالیت آنزیم کیتیناز و عملکرد در گلخانه وجود دارد. بررسی اثر T. harzianum 125 نیز نشان داد که این جدایه موجب افزایش فعالیت آنزیمهای فنیلآلانین آمونیالیاز و پراکسیداز در ریشه گیاه گوجه فرنگی میگردد.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_11000_bd7ab4000ec3079385c6e7183213b707.pdf
2014-12-01
177
181
تریکودرما
کیتیناز
فنیلآلانین آمونیالیاز
پراکسیداز
حدیث
مصطفی نژاد
1
نویسنده
AUTHOR
In this study, 20 isolates of Trichoderma were examined for their effectiveness as biological control agents of root knot nematode. The isolates were cultured in liquid culture medium containing colloidal chitin. According to results, isolates 125, 126 and 10 Bi of Trichoderma harzianum showed maximum chitinase activity compared to others. In greenhouse experiments, biological control potential of 6 isolates with maximum or minimum enzyme activity against the nematode was compared. Results showed that isolates with maximum rate of enzyme activity in laboratory experiments had better performance in greenhouse studies. T. harzianum 125 induced an increase in the activity of phenylalanine ammonia lyase and peroxidase in the roots of tomato plants.
1
ORIGINAL_ARTICLE
مکانیسم مقاومت در برابر تجمع ویروس برگ قاشقی سیب زمینی (Potato leafroll virus=PLRV) در سیب زمینی همسانه G8107(1) *
ژن خاموشی پس از ترا نویسی (Post-transcriptional gene silencing =PTGS) به عنوان یک مکانیسم طبیعی که به وسیله آن گیاهان اسیدهای نوکلئیک بیگانه مانند ژنوم ویروسها را شناسایی و تجزیه میکنند مطرح است. در این مطالعه فرض شد که در مقاومت سیب زمینی همسانه G8107(1) در برابر تجمع PLRV نیز چنین مکانیسمی دخالت دارد. این فرضیه با آزمایش انتقال ویروس از طریق پیوند آزمون شد. در این آزمایش قطعاتی از ساقههای عاری از ویروس سیب زمینی همسانه G8107(1) (به عنوان گیاه مورد آزمایش) و رقم Maris Piper (MP) (رقم حساس به PLRV به عنوان گیاه شاهد) روی ساقههای بوتههای سیبزمینی رقم MP آلوده به PLRV پیوند شدند. سپس قطعاتی از ساقههای عاری از ویروس رقم MP روی قطعات حدواسط پیوند زده شدند. نتایج نشان دادند که میزان تجمع PLRV در پیوندکهای پذیرندهای که روی قطعات ساقه همسانه G8107(1) پیوند خورده بودند در مقایسه با پیوندکهای پذیرنده پیوند شده روی ساقههای رقمMP تفاوت چشمگیری نداشتند. این امر نشان داد که وجود قطعات ساقه همسانهG8107(1) به عنوان پیوند حدواسط بر تجمع PLRV در پیوندکهای پذیرنده پیوند شده روی آنها تأثیری نداشته است. ظاهراً هیچگونه عامل ژن خاموشی که قادر به تجزیه آر.ان.ای PLRVباشد از همسانه G8107(1)به رقم MP منتقل نشده است. بنابراین عومل ژن خاموشی مفروض یا وجود ندارند یا اگر وجود دارند قابل انتقال نیستند. به هر حال چون ثابت شده است خاموشی ژن قابل انتقال است، به نظر منطقیتر میرسد که مقاومت سیبزمینی همسانه G8107(1) در برابر تجمعPLRV ناشی از ممانعت از تکثیر ویروس باشد تا تجزیه آن پس از تکثیر توسط مکانیسمی شبیه خاموشی ژن.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_11001_73bb72770ad917736fe0fe2fc859f921.pdf
2014-12-01
183
183
ژن خاموشی
پس ازترانویسی
PTGS؛ Gene-silencing
جعفر
نیکان
jnikan@gmail.com
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
همراهی Candidatus phytoplasma prunorum با کوتولگی زرد برگ آلو در ایران
به بیماریهای فیتوپلاسمایی پیچیدگی کلروتیک برگ زردآلو (Prunus armeniaca) ، لپتونکروز آلوی ژاپنی (P. salicina) و بیماریهای زردی و زوال هلو (P. persica) ، آلوی اروپایی (P. domestica) و بادام (P. duilcis) زردی اروپایی درختان میوه هستهدار (ESFY) گفته میشود ((Seemüller et al. 1998a. فیتوپلاسمای عامل این بیماری از نظر فیلوژنتیکی با فیتوپلاسماهای افژولش سیب (AP)، زوال گلابی (PD) و پیچیدگی برگ زرد هلو (PYLR) بسیار نزدیک است .علائم زردی به همراه بازماندگی رشد برگها در تابستان 1391 در استان مازندران دیده شد. ده نمونه دارای علائم و دو نمونه فاقد علائم از باغهای مختلف جمعآوری و برای شناسایی عامل بیماری مورد بررسی قرار گرفتند. دی ان ای کل از نیم گرم بافت رگبرگ اصلی با بهکارگیری CTAB(Murray & Thompson 1980) استخراج گردید و ردیابی فیتوپلاسما در نمونههای دی ان ا. توسط پیسیآر دو مرحلهای با جفت آغازگرهای P1/P7 (Deng & Hiruki 1991) (دور اول) و R16F2n/R2 (Gundersen & Lee 1996) و یا fU5/rU3 (Lorenz et al. 1995) (دور دوم) انجام شد. در نمونههای دارای علائم پس از انجام PCR دو مرحلهای یک باند 1200 جفت بازی با آغازگر R16F2n/R2 و یک باند 880 جفت بازی با آغازگر fU5/rU3 تکثیر شد در حالیکه در نمونههای سالم باندی دیده نشد. دو محصول پی سی آر از هر یک از جفت آغازگرها به طور مستقیم تعیین توالی شدند. توالیهای بهدست آمده با توالیهای مرجع دربانک جهانی ترادفها توسط نرم افزار بلاست مقایسه شد. توالیهای به دست آمده (شمارههای دسترسیKF739403، KF739404، KF739405 و KF739406) به میزان 99 درصد با ‘Ca. Phytoplasma prunorum’ (شمارههای دسترسی AJ575108, AJ542545 AJ575111) مشابهت داشتند. با توجه به اطلاعات موجود به نظر میرسد این اولین گزارش از همراهی‘Ca. Phytoplasma prunorum’ با کوتولگی برگ زرد درختان آلو در ایران است.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_11002_98370dab3a92744e08160851ec53f582.pdf
2014-12-01
185
185
-
توحید
الهوردی
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
اولین گزارش از بیماریزایی Alternaria interrupta روی کلم برگی (Brassica oleracea L. var. capitata) از ایران
به منظور شناسایی گونههای مسئول در ایجاد بیماری لکه سیاه کلم برگی در طول تابستان و پائیز سال 1391، نمونههای برگهای آلوده از مزارع تحت کشت کلم در ارومیه جمعآوری شدند و هرکدام داخل پاکت کاغذی جداگانه قرار داده شد و به آزمایشگاه منتقل شد. عمل جداسازی قارچها با کشت نمونههای گیاهی روی محیطهای کشت PCA (سیبزمینی- هویج-آگار)، PDA (سیبزمینی- دکستروز-آگار) و WA (آب-آگار) انجام گرفت. قارچهای رشد کرده با مشخصات جنس Alternaria با استفاده از روش تک هاگ کردن خالصسازی شدند. شناسایی گونهها با استفاده از روش توصیه شده سیمونز (Simmons 2007) و در شرایط کنترل شده شامل دمای 25 درجه سلسیوس، دوره نوری/ تاریکی 8/16 ساعته زیر نور سفید فلورسنت، محیط کشت PCA و بعد از گذشت 7-5 روز انجام گرفت. گونه A. interruptaبا مشخصات زیر شناسایی شد: پرگنهی قارچ به رنگ خاکستری روشن تا قهوهای روشن بوده و حلقههای متحدالمرکز از رشد و هاگزایی را نشان میدهد (شکل a1). میسلیومهای رویشی هم در داخل و هم در سطح محیط کشت رشد میکنند. هاگبر اولیه بلند بوده و معمولا بصورت انفرادی تولید میشود. زنجیرههای هاگها اغلب ساده بوده و تعداد 17-8 هاگ در هر زنجیره تشکیل میشود که 4-3 هاگ موجود در ابتدای زنجیره بزرگتر از بقیه هاگها هستند. هاگهای بزرگتر بیضی شکل کشیده بوده، 6-4 بند عرضی و 1 بند طولی در عریضترین بخش خود دارند و اندازه آنها 8-7×45-30 میکرومتر است (شکل b1). هاگهایی که در بخش بالایی زنجیره قرار دارند تخممرغی شکل بوده و اندازه آنها 6-4×20-10 میکرومتر است و 3-0 بند عرضی و ندرتاً 1 بند طولی دارند (شکل c1). کاهش ناگهانی در اندازه هاگها در زنجیره دیده میشود که مهمترین مشخصه این گونه است. دیواره خارجی هاگها صاف تا منقوط است. رنگ هاگها قهوهای تیره و هاگبرها قهوهای روشن است. آزمون بیماریزایی جدایههای این گونه روی برگهای جدا شده از گیاهان 3 ماهه کلم برگی انجام گرفت. ابتدا برگهای کلم زیر شیر آب شسته شده و توسط اتانول 70 درصد ضدعفونی سطحی شدند. برگها داخل ظروف پلاستیکی حاوی یک عدد کاغذ صافی مرطوب قرار داده شدند. حلقههای به قطر 5 میلیمتر از حاشیه در حال رشد فعال پرگنههای قارچ (5-4 روزه) برداشته شد و در سطح پهنک برگ قرار گرفت، بهطوریکه قارچ مماس با سطح برگ باشد. درب ظروف جهت حفظ رطوبت بسته شد و مجموعه در اتاقک رشدی با دمای 25 درجه سلسیوس به مدت یک هفته نگهداری شد. در نمونههای شاهد از حلقههای محیط کشت بدون قارچ استفاده شد. بعد از گذشت این مدت نشانههای بیماری شامل زردی و قهـوهای شدن بافت برگ در اطراف محل مـایـهزنی دیـده شـد، در شکل1. پرگنه قارچ (a)، زنجیره هاگ (b) و هاگبر و هاگهای بزرگتر (c) در گونه A. interrupta Fig. 1. Fungal colony (a), conidial chain (b) and conidiophore and larger conidia (c) in A. interrupta شکل2. برگ کلم مایهزنی شده توسط جدایهای از گونه A. interrupta(a) و تیمار شاهد (b) Fig. 2. Cabbage leaf inoculated with an isolate of A. interrupta (a) and control treatment صورتیکه در تیمار شاهد هیچگونه نشانهای دیده نشد (اشکال a2 و b2). عمل کشت و جداسازی مجدد قارچ تلقیح شده از برگهای آلوده شده کلم انجام گرفت و لذا اصول کخ در مورد جدایههای این گونه به اثبات رسید. گزارشهای قبلی مبنی بر وجود گونههای Alternaria brassicicola, A. brassicae و A. raphaniمرتـبـط با آلـودگی کـلم در ایران وجود دارد (Ershad 2009) و این اولین گزارش از وجود و بیماریزایی گونه A. interruptaروی کلم در ایران است.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_11003_41e584de9164fc2354473c255c2b32f6.pdf
2014-12-01
187
188
-
طاهره
رحیملو
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
اولین گزارش از Diplodia seriata عامل بیماری شانکر و خشکیدگی شاخههای درختان سیب در ایران
طی مطالعه روی عوامل بیماریزای شاخه و تنه درختان سیب در باغهای زیر کشت این محصول در شهرستان ارومیه، از درختان سیب رقم گلدن با سن بالای 15 سال و با نشانههای شانکر در بخش تنه و شاخهها، خشکیدگی شاخهها، پوسته پوسته شدن سطح شاخهها و نیز قهوهای شدن پوست در بخشهای آلوده (شکل 1-A)، جدایههایی پیکنیدیومدار به دست آمد.خالصسازی جدایههای رشد کرده به روش کشت نوک ریسه انجام گرفت. برای القای تشکیل اندامهای باردهی ابتدا جدایههای خالص شده در تشتکهای پتری حاوی محیط کشت آب آگار 2 درصد کشت شدند. سپس سوزنهای سترون شده کاج در چند محل در سطح محیط کشت قرار داده شدند وتشتکهای پتری به مدت 4 هفته در دمای 25 درجه سلسیوس و در زیر نور نزدیک ماورا بنفش (near-UV) و با دوره نوری 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی نگهداری شدند. بعد از گذشت این مدت، پیکنیدیومها به فراوانی روی سوزنهای کاج تشکیل شدند (Pavlic et al. 2008). برای شناسایی، معیارهای مختلف ماکروسکوپی مانند رنگ و خصوصیات ظاهری رشدی پرگنه و مشخصات میکروسکوپی مانند رنگ، شکل و ابعاد هاگ، یاختههای هاگزا و پیکنیدیوم مورد مطالعه قرار گرفتند. برای تکمیل شناسایی مورفولوژیک،بخش ITS در یکی از جدایههای منتخب، با استفاده از آغازگرهای ITS1 و NL-4 تکثیر و ترادفیابی گردید. بر اساس مطالعات ریخت شناختی و ترادف یابی بخش ITS، گونه Diplodia seriata De Not.شناسایی گردید (Phillips et al. 2007). جستجوی بلاست توالی بهدست آمده با توالیهای موجود در بانک ژن (NCBI) شباهت 100 درصدی آن را با توالیهای متعلق به گونه D. seriata، تایید نمود. مشخصات توصیفی گونه به این شرح است: میانگین قطر رشد پرگنه در جدایهها بعد از گذشت 3 روز برابر 80-75 میلیمتر بود. بافت پرگنه در ابتدا سفید رنگ، ولی بعد از گذشت سه روز از بخش میانی به رنگ زیتونی متمایل به سبز تا زیتونی خاکستری تغییر یافته و در نهایت بعد از گذشت دو هفته کاملاً سیاه رنگ شد. پرگنه دارای حاشیه منظم و با ریسههای هوایی متراکم و فشرده روی محیط کشت بود. کنیدیوماها به صورت پیکنیدیوم، گرد تا بیضی شکل، به قطر تقریبی 380 × 260 میکرومتر، به طور منفرد یا در دستههای چندتایی، به رنگ قهوهای تیره تا سیاه و فرورفته در بافت تشکیل شده و در C B A D E شکل[H1] 1. نشانههای شانکر و خشکیدگی شاخه درختان سیب رقم گلدن در باغهای ارومیه (A)، برش طولی پیکنیدیوم (B) و هاگهای (C) گونه Diplodia seriata و آزمون اثبات بیماریزایی گونه Diplodia seriataروی نهالها (D) و میوه (E) سیب رقم گلدن. Fig. 1. Canker symptoms on stems of apple Golden cultivar in Urmia orchards (A), Longitudinal section of pycnidium (B) and conidia (C) of Diplodia seriata and Pathogenicity tests of Diplodia seriata on seedlings (D) and fruits (E) of apple Golden cultivar. هنگام بلوغ کمی شکوفا است (شکل 1-B). یاختههای هاگزا بیرنگ، صاف، استوانهای شکل، در قسمت پایه متورم و به ابعاد 12-7 × 5-3 میکرومتر بودند. هاگزایی در یک سطح با قطور شدگی حاشیهای (Periclinal) و یا بهصورت پیرست[H2] (Percurrent) و دارای 2 یا 3 حلقه بود. هاگها با دیواره ضخیم، با سطح بیرونی صاف، سطح درونی زگیلدار و کاملاً مشخص، بیضی تا استوانهایشکل، با انتهای گرد و در قسمت پایه بهطور مشخص تخت و بریده و بهندرت گرد بودند. هاگها ابتدا بی رنگ و تک یاخته بوده و سپس قبل از خارج شدن از پیکنیدیوم با تشکیل یک بند عرضی، دو یاختهای میشدند و رنگ آنها به قهوهای روشن تا قهوهای تیره تغییر یافت(شکل 1-C). در برخی موارد، هاگها بعد از خروج از پیکنیدیوم دارای 2 یا 3 بند عرضی بودند. ابعاد هاگها (31-) 02/22- 6/20 (-12) × (12-) 05/10- 6/9 (- 5/7) میکرومتر و نسبت طول/عرض هاگ برابر 2/2 بود.اثبات بیماریزایی جدایهها، با مایهزنی آنها روی نهالهای دو ساله و نیز میوه سیب رقم گلدن در قالب طرح کاملاً تصادفی به همراه تیمار شاهد انجام گرفت. بعد از گذشت 8 هفته، تمام نهالهای مایهزنی شده نشانههای شانکر و خشک شدن پوست در اطراف محل مایهزنی را نشان دادند (شکل 1-D)، در آزمون بیماریزایی روی میوهها، مشخص شد که بعد از گذشت 6 روز، در اطراف محل مایهزنی، نشانهها به صورت پوسیدگی قهوهای تیره با حاشیه کاملاً مشخص و متمایز از بافت سالم ایجاد شد (شکل1-E) و در برش عمودی از بافت میوه در محل مایهزنی، پیشرفت پوسیدگی به داخل بافت گوشت میوه بهطور مشخصی مشاهده شد. جداسازی قارچ از نهالها و میوههای مایهزنی شده مجدداً انجام گرفت. بر اساس بررسی منابع و اطلاعات موجود، این اولین گزارش از وجود و تعیین بیماریزایی گونه D. seriata مرتبط با شانکر درختان سیب در ایران است. [H1]تصاویر جابجا شده بود که اصلاح شد. [H2]پیرست (Percurrent) اصلاح شد.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_11004_adebdfd292cb7a41ccc549b3ad5f084c.pdf
2014-12-01
189
190
-
سیامک
حنیفه
1
نویسنده
AUTHOR
ORIGINAL_ARTICLE
ردیابی ویروئید کوتولگی رازک در درختان لیموترش، لیموشیرین، کلمانتین، نارنگی و گریپفروت استان مازندران
ویروئید کوتولگی رازک از جنس Hostuviroid در مناطق مرکبات کاری سراسر دنیا به عنوان عامل ایجاد کننده اککسیا و زایلوپروز در نارنگیهاC. unshiu Marco., C. nobilis Lour.) reticulate Blanco,(Citrus و هیبریدهای آنها، اکثر تانجلوها (Macf. C. reticulate × C. paradisi) و تانجورها (C. reticulata × C. sinensis (L.) Osb.) همچنین لیمو شیرین (C.limettioides Hort. ex Tanaka) شناخته شده و در اکثر آنها کوتولگی و ساقه آبلهای را ایجاد میکند. علائم کاککسیا در نارنگی و دورگههای آن شامل زردی عمومی درخت، صمغ زیر پوست، فرورفتگیهایی در آوند چوبی و تشکیل برجستگیهای ریز در سطح کامبیوم پوست که در چوب فرو رفتهاند است. شدت علائم بسته به رقم میزبان و استرین ویروئید متفاوت است. به منظور بررسی گسترش بیماری در بعضی گونههای دارای علائم و بدون علائم در مرکبات رایج استان مازندران، نمونهبرداری به صورت تصادفی از درختان کلمانتین (C. reticulata Blanco)، ارقام قدیمی نارنگی وازه ساتسوما (C. unshiu) و لیموشیرین که همگی علائم ساقه آبلهای و صمغ زیر پوست را در قسمت بالایی ناحیه پیوند نشان میدادند و درختان لیمو ترش [( C. limon (L.) Burm. f., Local cultivar )] ، گریپ فروت دانکن (C. paradisi Macf.) که بدون علائم بودند صورت گرفت. استخراج RNA از برگ با استفاده ازماده ترایزول (Invitrogen, Carlsbade, CA) انجام شد. نتایج حاصل از واکنش زنجیرهای پلیمراز با ترانویسی معکوس RT-PCR )) با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ویروئید کوتولگی رازک و الکتروفورز محصولات روی ژل آگاروز 2% نمایانگر وجود قطعات bp300 مورد انتظار ویروئید کوتولگی رازک در همه درختان ساتسوما (20 از 20) و 77% از درختان کلمانتین (19 از 25)، و بهترتیب در 63% (14 از22)، 100% (12 از 12) و 33% (5 از 15) از درختان لیموشیرین، لیموترش و گریپ فروت بود. این درختان فاقد علائم منابع پنهان ویروئید هستند که به نگهداری و گسترش ویروئید کوتولگی رازک کمک میکنند بنابراین استفاده از آزمایشهای دقیق ردیابی مولکولی در مناطقی که برنامههای ریشهکنی بهکار گرفته شده لازم است. این اولین گزارش آلودگی لیموترش و گریپفروت به ویروئید کوتولگی رازک از ایران است.
https://ijpp.areeo.ac.ir/article_11005_451badff7b383ff6e9a190d6d216834e.pdf
2014-12-01
191
191
-
رامتین
وامنانی
1
نویسنده
AUTHOR