جداسازی و شناسایی جدایه‌های باسیلوس تهران و ارزیابی فعالیت ضدقارچی آن‌ها علیه جدایه‌های قارچ فوزاریوم عامل بیماری بلایت فوزاریومی سنبله گندم اردبیل

نوع مقاله: مقاله کامل پژوهشی

نویسندگان

1 مسئول مکاتبه

2 نویسنده

چکیده

بیماری بلایت فوزاریومی سنبله گندم از لحاظ اقتصادی یکی از مهمترین بیماری‌های قارچی گندم در سرتاسر جهان می‌باشد. هدف از انجام این تحقیق بررسی و شناسایی متابولیت‌های ضدقارچی جدایه‌های بومی باسیلوس بود. جدایه‌های باسیلوس از خاک مزارع کشاورزی گندم و جو (واقع شده در جنوب تهران در پاییز 91) جداسازی شد و علیه چندین جدایه فوزاریوم بومی جداسازی شده از دانه‌های گندم آلوده فعالیت آنتاگونیستی نشان داد. تخلیص و شناسایی متابولیت‌های ضدقارچی تولید شده توسط جدایه منتخب باسیلوس در محیط نوترینت براث انجام شد. روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا بر روی عصاره تخلیص شده حضور آنتی‌بیوتیک‌های لیپوپپتیدی ایتورین را به عنوان پیک اصلی نشان داد به طوری که با ایتورین آ خالص شرکت سیگما قابل مقایسه بود. ساختار متابولیت‌های ضدقارچی تخلیص شده به وسیله روش‌های طیف‌سنجی مادون قرمز و طیف‌سنجی جرمی بر پایه کروماتوگرافی مایع مورد شناسایی قرار گرفت و ساختار ایتورینی آن تأیید گردید. آنالیز طیف‌سنجی جرمی همچنین توانایی باسیلوس منتخب را در تولید فنجی‌سین علاوه بر ایتورین آ اثبات نمود.  توالی ژنومی جدایه باسیلوس منتخب 9/99 درصد با توالی ژنومی باسیلوسآریاب‌هاتایی و ژنوم جدایه منتخب فوزاریوم 99 درصد با فوزاریوم گرامینئاروم قرابت ژنومی نشان داد. بر اساس نتایج حاصل از این تحقیق، اثرات ضدقارچی جدایه‌های بومی باسیلوس و نیز اثرات آن‌ها در کنترل بیولوژیک بیماری بلایت فوزاریومی سنبله گندم مورد تأیید قرار گرفت.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Isolation and characterization of Bacillus isolates from Tehran and investigation of their antifungal activity against some species of Fusarium head blight fungi from Ardebil

نویسندگان [English]

  • S. Selseleh-zakeri 1
  • A. Akhavan-sepahy 2
  • A. Khanafari 2
  • S. Saadat-mand 2
چکیده [English]

Fusarium head blight (FHB) is economically one of the most important fungal diseases of wheat in the world. The aim of this research was to determine the antifungal metabolites of native Bacillus isolates. Bacillus strains isolated from soil of wheat and barley fields (Rural areas of southern Tehran, autumn 2012), and exhibited in vitro antagonistic activity against some Fusarium species isolated from infected wheat seeds (Wheat fields of Parsabad at Moghan, Ardebil Summer 2012). An attempt was made to partially purify and characterize the diffusible antifungal metabolite/s produced by the selected Bacillus strain in Nutrient broth medium. High Performance Liquid Chromatography (HPLC) of partially purified extract of the strain showed the presence of lipopeptide antibiotic iturin as a major peak that was comparable to that of standard iturin A (11.80 min) from Sigma–Aldrich. The structure was further confirmed by Fourier Transform-Infrared Spectrum (FTIR) and Liquid Chromatographic Mass Spectrometric (LCMS) analysis as iturin A. LCMS analysis also showed the presence of fengycin with iturin A. The genome of the selected isolate of Bacillus had shown 99/9 percent similarity by B. aryabhattai and the genome of the selected isolates of Fusarium had shown 99 percent similarity by F. graminearum. According to the results of this experiment, the antifungal effects of native Bacillus strains and also their effects in the biological control of wheat FHB disease were confirmed.
 

کلیدواژه‌ها [English]

  • Bacillus
  • Wheat
  • Fusarium head blight
  • Iturin
  • Fengycin